Трихром по Гомори
Трихром Гомори (Окраска трихромом по Гомори) — вариант трёхцветного окрашивания микропрепаратов, который позволяет различить коллагеновые волокна, мышечную ткань и эритроциты[1]. Используется при окрашивании материала биопсий для диагностики некоторых форм митохондриальных миопатий[2], например, немалиновых миопатий[англ.][3].
Также может быть использован для окрашивания миелиновых оболочек периферических нервов[4].
Используемые реагенты
править
В настоящее время наибольшее распространение имеют модифицированные варианты трихрома Гомори, такие как модификация Энгеля-Каннингема[6]. Цитоплазма и соединительно-тканные волокна окрашиваются с помощью раствора фосфотунгстовой кислоты или уксусной кислоты.
- Для усиления конечной окраски срезы тканей обрабатывают жидкостью Буэна[англ.] (в состав входит насыщенный водный раствор пикриновой кислоты, 40% формалин, ледяная уксусная кислота, гидроксид натрия и натрий-фосфатный буфер[7]).
- Ядра окрашивают железным гематоксилином Вейгерта или гематоксилином Харриса.
- Хромотропом 2R[нем.] окрашивается цитоплазма и мышечные волокна.
- Зелёный прочный FCF либо светло-зеленый SF[англ.] (в оригинальном протоколе Гомори[2]) или анилиновый синий используется для окрашивания коллагеновых волокон.
После окрашивания микропрепарат промывают в уксусной кислоте, чтобы сделать его более прозрачным[6][1].
Результат окрашивания
править- Ядра окрашиваются в оттенки от красного до фиолетового.
- Миофибриллы нормальных мышц окрашиваются в зелёно-голубые оттенки (в зависимости от используемого красителя). А-диски и I-диски саркомера принимают вид чётко различимых полос.
- Мембраны между миофибриллами окрашиваются в красный.
- Коллаген окрашивается в зелёный[6].
Ссылки
править- ↑ 1 2 Sigma Aldrich. Trichrome Stains (Gomori). Instructions for Use. Дата обращения: 24 октября 2024.
- ↑ 1 2 GoMori, George (1950-07-01). "A Rapid One-Step Trichrome Stain*". American Journal of Clinical Pathology. 20 (7_ts). Oxford University Press (OUP): 661—664. doi:10.1093/ajcp/20.7_ts.661. ISSN 0002-9173.
- ↑ Sewry, Caroline A.; Laitila, Jenni M.; Wallgren-Pettersson, Carina (2019). "Nemaline myopathies: a current view". Journal of Muscle Research and Cell Motility. 40 (2). Springer Science and Business Media LLC: 111—126. doi:10.1007/s10974-019-09519-9. ISSN 0142-4319.
- ↑ Grunnet, Margaret L. (1978-10-01). "Gomori's Trichrome Stain". Archives of Neurology. 35 (10). American Medical Association (AMA): 692. doi:10.1001/archneur.1978.00500340068014. ISSN 0003-9942.
- ↑ Abu-Amero K.K., Al-Dhalaan H., Bohlega S., Hellani A., Taylor R.W. A patient with typical clinical features of mitochondrial encephalopathy, lactic acidosis and stroke-like episodes (MELAS) but without an obvious genetic cause: a case report (англ.) // J Med Case Reports[англ.] : journal. — 2009. — Vol. 3. — P. 77. — doi:10.1186/1752-1947-3-77. — PMID 19946553. — PMC 2783076.
- ↑ 1 2 3 Gomori Trichrome Stain Protocol (Engel-Cunningham Modification). Neuromuscular Disease Center, Washington University. Дата обращения: 24 октября 2024.
- ↑ "Bouin's fixative". Cold Spring Harbor Protocols. 2006 (1). Cold Spring Harbor Laboratory: pdb.rec9964. 2006. doi:10.1101/pdb.rec9964. ISSN 1940-3402.